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脂質體2000轉染試劑

簡要描述:脂質體2000轉染試劑
Lip2000 是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑。適合于將核酸(DNA 和 RNA)轉染入真核細胞,具有低細胞毒性;對多種類型的細胞和培養板都具有高轉染效率;轉染時血清的存在不影響轉染效率的優點。適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(脯乳動物細胞系)的轉染。

  • 產品型號:C6031
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2025-02-24
  • 訪  問  量: 656

詳細介紹

品牌Bioss貨號C6031
供貨周期現貨應用領域醫療衛生,化工,生物產業,制藥

脂質體2000轉染試劑

保存條件 2-4℃保存一年(避免冷凍)。

脂質體2000轉染試劑

產品簡介:

Lip2000 是一種新型的陽離子脂質體轉染試劑。適合于將核酸(DNA 和 RNA)轉染入真核細胞,具有低細胞毒性;對多種類型的細胞和培養板都具有高轉染效率;轉染時血清的存在不影響轉染效率的優點。適用范圍:貼壁細胞和懸浮細胞(脯乳動物細胞系)的轉染。



質粒 DNA 轉染:

對大多數細胞來說,DNA(µg)與 Lip2000(µI)的比例為 1:2~3。轉染時高的細胞密度可以得到高的轉染效率和表達水平,并能減少細胞毒性。

1.  以 24 孔板為例

a.  貼壁細胞:轉染前一天,用 500 µI 不含抗生素的培養基接種 0.5-2×10

5 細胞,使之第二天能達到 70- 90%匯合。

b.  懸浮細胞:在準備 DNA-Lip2000 復合物之前,用 500 µI 不含抗生素的培養基接種 4-8×10

5 細胞即可。

2.  對每個轉染樣品,進行以下操作

a.  在eppendorf管里分別加入50 µI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和0.8 µg DNA,輕柔混勻,制成DNA稀釋液。

b.  在另一個eppendorf管里分別加入50 µI Opti-MEM I ReLipced Serum Medium和2.0 µI Lip2000(注意用前 先混 勻),輕柔混勻,制成Lip2000 稀釋液,室溫靜置5分鐘。

c.  將DNA稀釋液和Lip2000稀釋液混合,輕柔混勻,室溫靜置20分鐘,形成DNA-Lip2000復合物。DNA-Lip2000復合物在室溫下可穩定存在6小時。

3.  將DNA-Lip2000復合物加入到接種好的細胞中,將培養板輕輕地前后搖動,使復合物分散均勻。

4.  在37℃ 二氧化碳培養箱中培養4-6小時后更換培養基,繼續培養18-48小時。

5.  如果要篩選穩定細胞株,則在轉染24小時后將細胞按照1:10或更高的比例接種到新鮮培養基中,第二天加入選擇性培養基進行篩選。


質粒DNA轉染的優化為達到最高的轉染效率和降低細胞毒性的影響,可以對DNA和Lip2000的比例以及細胞密度進行優化,一般在1: 0.5~5的范圍內優化DNA (µg)和Lip2000(µI)的比例。





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